紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種常用的分析儀器，由于使用范圍廣，頻率高，經(jīng)常出現(xiàn)故障。了解光度計(jì)的常見(jiàn)問(wèn)題及處理方法，有助于及時(shí)解決問(wèn)題，保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

　　

　　1、關(guān)于儀器的預(yù)熱

　　

　　一般分光光度計(jì)的操作說(shuō)明中，要求儀器預(yù)熱時(shí)間在20分鐘左右；如果是帶微處理器的分光光度計(jì)，儀器開(kāi)機(jī)后會(huì)自動(dòng)進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài)，大概需要10分鐘。在分光光度計(jì)預(yù)熱的過(guò)程中，很多用戶(hù)或多或少都存在這樣的問(wèn)題，比如只預(yù)熱電路系統(tǒng)(不調(diào)整波長(zhǎng)，打開(kāi)吸收池黑盒蓋預(yù)熱等)，或者認(rèn)為初始化過(guò)程是預(yù)熱等。

　　

　　對(duì)于具有微處理器自檢功能的分光光度計(jì)，在儀器自檢(初始化)開(kāi)始后，在測(cè)量窗口上設(shè)置所需的波長(zhǎng)值，在吸收池中安裝純化水并放在光路上。調(diào)整“0000A”后，將儀器預(yù)熱，當(dāng)儀器讀數(shù)沒(méi)有變化時(shí)，再進(jìn)行測(cè)量。

　　

　　對(duì)于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，由于有兩個(gè)光源(鎢燈和氘燈)，為了延長(zhǎng)燈的使用壽命，可以在通電自檢后關(guān)閉測(cè)量中不使用的光源燈。
 

　　

　　2、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查和校正

　　

　　日常使用分光光度計(jì)的時(shí)候有沒(méi)有經(jīng)常檢查波長(zhǎng)準(zhǔn)確度？答案是否定的，日常測(cè)量中儀器靈敏度下降時(shí)，要檢查波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。簡(jiǎn)單的檢查方法(粗略檢查)是:儀器開(kāi)啟后，將波長(zhǎng)調(diào)至580nm，在吸收池底座的光通道中插入一張白色卡片紙。如果能觀察到矩形黃點(diǎn)，則波長(zhǎng)精度在正常范圍內(nèi)，否則應(yīng)進(jìn)行波長(zhǎng)校正。

　　

　　當(dāng)儀器被長(zhǎng)距離運(yùn)輸、機(jī)械振動(dòng)或更換燈泡時(shí)，必須檢查并校正波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。粗略檢查同上，其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法，使用氘燈的特征發(fā)射線校正法。

　　

　　3、關(guān)于吸光度測(cè)量的重復(fù)性

　　

　　在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的測(cè)定過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)同一溶液在不同的時(shí)間有不同的測(cè)定結(jié)果，即重復(fù)性不好。原因是什么？排除測(cè)量誤差的因素，可能的原因有:

　　

　　（1）儀器預(yù)熱時(shí)間不足或預(yù)熱方法不正確，應(yīng)延長(zhǎng)預(yù)熱時(shí)間或采用正確的預(yù)熱方法。

　　

　　（2）光電轉(zhuǎn)換器(如光電池)的光電轉(zhuǎn)換效率因長(zhǎng)期使用而發(fā)生變化。此時(shí)標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)溶液的吸光度也較低，在相對(duì)定量時(shí)對(duì)結(jié)果影響不大。但對(duì)于這類(lèi)儀器，一般建議連續(xù)使用時(shí)間不要超過(guò)3小時(shí)。如果需要長(zhǎng)時(shí)間使用，最好間歇使用30min分鐘。